生殖器疱疹的检查项目

　　生殖器疱疹的检查项目有哪些?齐齐哈尔现代男科医院专家介绍，生殖器疱疹主要是由单纯疱疹病毒Ⅱ型侵犯生殖器部位皮肤及黏膜引起的炎症性性传播疾病。大多数通过性接触感染，新生儿可通过胎盘及产道感染。HSV-Ⅱ是生殖器疱疹的主要病原体，单纯疱疹病毒可分为HSV-I和HSV-Ⅱ两个亚型。HSV-工主要引起口唇等部位的单纯性疱疹。生殖器疱疹的检查项目包括：

　　一、HSV培养法

　　1.方法简介①取材：以生理盐水棉拭子轻拭皮疹表面，水疱取材法为以4~5号针头抽取疱液及以针头斜面同时刮取糜烂底部组织;糜烂面取材法为组织分离手术刀片刮取糜烂底部组织;并将取得标本立即置于培养基中接种，或置- 80。C冰箱中备用。②培养：将生长旺盛的Vero细胞1×l05离种于24孔板中(100/0 FCS - 1640培养基)，置5%CO，，37℃培养24小时，使成致密单层，再将标本液以每孔0. 2ml置于Vero细胞孔中，复孑L(一孔含12mm小圆玻片)按前述条件继续培养24小时。③结果观察：置于显微镜下见Vero细胞变圆、变大，并出现细胞融合现象者为阳性。 .

　　2.仪器设备显微镜、培养基等。

　　3.诊断价值 自水疱底取标本进行组织培养分离病毒仍然是目前最敏感和最特异的诊断方法，一直是诊断绝大多数HSV感染的“金标准”，也可作为评价其他方法的标准。但此法所需技术条件高(需细胞培养)，操作繁琐，从接种到做出鉴定所需时间是5 N10天，价格昂贵，加上敏感性欠佳，临床应用有一定局限性。此法国内尚未普遍开展。HSV -1和HSV -2能够在人和动物的多种细胞中繁殖，但是，对来自临床标本的HSV直接分离的最敏感材料包括人胚胎肾、原发性人羊膜、原发性豚鼠胚胎和原发性家兔肾细胞以及二倍体的人胚胎肺和包皮成纤维细胞，用于病毒分离的组织应该仔细地绞碎或用胶原酶或胰蛋白酶分解，用组织培养液冲洗并且接种到细胞培养基上。用存活细胞而不是被均化组织的澄清悬液的接种增加了含少量病毒标本的HSV分离的可能性，特别是如果抗体存在，抗病毒治疗已经实施的情况。液体应该是从新鲜水疱中抽取并且被直接接种到细胞培养基中。因为水疱液中，病毒的滴度在最初的24小时期间通常是最高的，因而，用于培养的液体应该尽可能是就地采取。其他组织和体液，当怀疑有HSV感染时，所有的标本都应在冰中被带到实验室并且立即进行培养。他们应该在OoC被保存几小时(但不要放在冰箱的冷冻层或在- 20℃冷库)，如果细胞培养不能在12~ 24小时被接种，标本应该在- 70C或更低温度下保存，当病毒接种时，典型的细胞病变作用包括单个细胞变圆和增大、细胞融合并且有多核巨细胞形成，通常在24～48小时内明显。低滴度标本或含有抗HSV抗体的液体标本在_周或更长时间可能不产生细胞病变效果，因而培养在被鉴定为阴性前，应该观察至少二周，病毒分离应该通过应用特异性抗血清或型特异性单克隆抗体等血清学技术或通过核酸杂交，被确证为HSV，标本接种后24~ 48小时内，(甚至在特征性细胞病变作用出现之前)，通过应用对细胞培养的快速抗原或核酸发现技术，能够发现和鉴定正在复制的病毒，这经常加速诊断，但可能减少敏感性，对低滴度标本尤其如此。因而，如果快速方法产生阴性结果，应该继续观察复制培养。

　　二、生殖器疱疹病毒抗原检测(HSV - EIA法)

　　1.方法简介将患者生殖器皮肤黏膜表面水疱弄破后，用消毒拭子吸收疱液并用拭子摩擦溃疡和糜烂面，尽可能多采集溃疡面的细胞及渗出液。有红斑、皲裂、结痂等不典型皮损者用钝刀轻轻刮取渗出液和皮损痂皮，将拭子标本置于Iml HSV保存液中洗脱，移去拭子备用。试验严格按照试剂盒说明书操作进行。洗板采用Anthos Fluido型自动洗板机，在Anthos2010型酶标仪上读取及采集数据。

　　2.仪器设备HSV - EIA试剂盒、自动洗板机、酶标仪等。

　　3.诊断价值+GH疱液和皮损渗出液HSV阳性率与病期有关，病期≤3天者检出阳性率明显高于≥7天者，提示发病早期进行HSV检测有利于提高阳性检出率，及时治疗可缩短病程，降低复发。GH的早期实验室诊断具有重要意义。单纯疱疹病毒抗原酶联免疫试剂盒是利用酶联免疫反应双次放大技术，可增强检测信号及提高检测敏感性，与HSV培养法相比，具有快速、敏感、简易等特点，适于临床应用。 》》得了生殖器疱疹怎么办？点击咨询《《

　　三、细胞学方法

　　1.方法简介用刮器刮取水疱剥脱面或溃疡的边缘，结痂性损害则先用盐水湿润、软化和除去痂皮，取溃疡或糜烂边缘刮削物。将标本直接涂于95%乙醇湿润的载玻片上，做Papanicolaou染色或赖特染色、姬姆萨染色。如需快速报告，涂片可不固定，加一滴甲基蓝，上覆盖片，立即镜检，镜下可见HSV感染的细胞。

　　2.仪器设备显微镜等。

　　3.诊断价值HSV感染细胞的特征：早期为单核细胞，胞浆少，胞核增大，核膜增厚，核仁在解体前增大;晚期出现多核巨细胞，其胞核大小不一，核膜增厚，胞核之间出现“花边”，胞浆显示变性。此外，胞核内可见嗜酸性颗粒状包涵体。上述细胞不仅见于生殖器脱落细胞，也见于其他器官内。此法简单、快速、便宜，可广泛应用，但敏感性只有培养法的40%～50%，所以阴性结果不能排除HSV感染。

　　由HSV引起的损害的组织学表现提供了快速和实践诊断方法，多核巨细胞和含有嗜酸性细胞核内包涵体的上皮细胞能够把HSV损害与几乎所有其他病原菌导致的损害区别开来。除了HSV外，仅仅麻疹和水痘一带状疱疹病毒产生多核巨细胞和嗜酸细胞核内包涵体。但是，麻疹的皮疹在正常情况下并不是水疱，且此病在临床或流行病学与HSV感染并不相似。并且麻疹的损害在组织学上与HSV损害明显不同。由HSV导致的特征性细胞学改变能够在Tzanck涂片中很容易地显示出来，从早期水疱的基底部刮取，轻轻地涂在显微镜玻片上，并用苏木一伊红、姬姆萨、巴帕尼科拉乌染色，特别是当损害有细菌或真菌性继发感染时，钻孔活检为组织学检查提供了更可靠的材料。活检也有利于水疱前阶段的诊断。活检标本应取自损害的边缘，并用Bouin液固定或其他酸性固定物固定，以便最好地显示细胞核内包涵体。也能通过电子显微镜，检查刮取物、水疱液和活检标本中的病毒颗粒。然而，电子显微镜和组织病理学检查都不能区别HSV和水痘一带状疱疹感染，这只能通过病毒分离或组织、水疱液中的HSV、抗原或核酸的直接发现来鉴别。

　　四、聚合酶链反应( PCR)

　　1.方法简介用生理盐水拭子清洁皮疹表面后吸取疱液或用手术刀轻刮基底部组织(以不出血为度)，将取材立即置于盛有Iml生理盐水的消毒试管内送检。

　　2.仪器设备PCR荧光法检测试剂盒等。

　　3.诊断价值荧光PCR法检测HSV不易受皮疹形态的影响，操作简单、快速、敏感性高、特异性好，其检出率是细胞培养法的2.5倍，且能够进行分型，因而有利于GH的诊断和流行病学调查，适于临床应用。但我国尚未有批准用于生殖器疱疹病毒临床诊断的PCR试剂盒。此外，用于临床常规检测应达到国家规定的PCR实验室条件。

　　五、血清学检查

　　1.方法简介检测HSV抗体的方法包括补体结合试验、中和试验、被动血凝试验、间接免疫荧光试验、免疫酶试验、放射免疫试验、ELISA、免疫印迹试验( WBA)。其中许多方法以感染l型和2型毒株的细胞培养物为抗原，难于区分病毒抗体的类型。这些方法中，以中和试验和间接免疫荧光试验使用较多，主要用于回顾性诊断原发性感染，对恢复期或复发性生殖器疱疹的诊断意义不大。当用于回顾性诊断原发性病毒感染时，应在急性期和恢复期取双份血清，恢复期血清抗体滴度是急性期抗体滴度的4倍或4倍以上时有意义。病毒感染的型特异性血清学诊断方法(主要是WBA和一部分ELISA试验)，采用病毒的型特异性的糖蛋白G(gG -1和gG -2)为抗原，可敏感特异性检测并区分血清中的抗1型病毒和抗2型病毒抗体。目前尚无商品化的HSV血清抗体的蛋白印迹检测试剂盒面世，这种方法仅限于某些专业实验室中进行。

　　2.仪器设备血清学检查相关设备。

　　3.诊断价值 由于血清学诊断不能区分口唇感染和生殖器感染，而且目前市场上的单纯疱疹病毒血清抗体检测试剂盒并不能准确区分1型和2型病毒感染，致使许多临床医生并未意识到其重要性。事实上，大部分生殖器疱疹病毒感染无症状或症状不典型，而不论是否出现皮损，感染者均存在着潜在的传染性。亚临床无症状感染在该病性传播中起着重要作用，未及时发现这类感染者并采取相应预防措施是造成生殖器疱疹流行的重要因素。对于有症状者，应选择病毒分离培养或抗原及DNA检测方法来诊断;而对于无皮损者，血清学试验是判断是否感染的最好方法。型特异性血清抗体检测是发现亚临床无症状感染者的最可行手段，因而型特异性血清学诊断对于防止生殖器疱疹的性传播和母婴传播有着重要意义。型特异性血清学诊断方法在生殖器疱疹的临床研究、流行病学研究和监测中将发挥重要作用。

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